地表水體富營(yíng)養(yǎng)化程度的評(píng)價(jià)

1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

(1)根據(jù)布點(diǎn)采樣原則，選擇適宜方法進(jìn)行布點(diǎn)，掌握測(cè)定水體總氮、總磷、COD及初級(jí)生產(chǎn)力的采樣和監(jiān)測(cè)方法。

(2)根據(jù)參數(shù)指標(biāo)的監(jiān)測(cè)結(jié)果，學(xué)會(huì)用參數(shù)法和綜合營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)指數(shù)法評(píng)價(jià)水體的富營(yíng)養(yǎng)化狀況。

2.實(shí)驗(yàn)原理

我國(guó)湖泊富營(yíng)養(yǎng)化評(píng)價(jià)的基本方法主要有參數(shù)法、綜合營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)指數(shù)(TSI)法(營(yíng)養(yǎng)度指數(shù)法)、評(píng)分法、數(shù)學(xué)評(píng)價(jià)法等。該實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定總氮(TN)、總磷(TP)、葉綠素a含量(chla)和初級(jí)生產(chǎn)力等指標(biāo)，利用參數(shù)法和綜合營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)指數(shù)法對(duì)湖泊水體富營(yíng)養(yǎng)化進(jìn)行相關(guān)評(píng)價(jià)。

3.實(shí)驗(yàn)材料

儀器設(shè)備與試劑詳見(jiàn)COD、總氮、總磷的測(cè)定實(shí)驗(yàn)，多參數(shù)水質(zhì)測(cè)定儀JH-LMW8000。

4.實(shí)驗(yàn)步驟

1)COD的測(cè)定

參見(jiàn)君翰多參數(shù)水質(zhì)測(cè)定儀JH-LMW8000型

2)總氮的測(cè)定

參見(jiàn)君翰多參數(shù)水質(zhì)測(cè)定儀JH-LMW8000型

3)總磷的測(cè)定

參見(jiàn)君翰多參數(shù)水質(zhì)測(cè)定儀JH-LMW8000型

4)水藻類葉綠素a的測(cè)定

(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>

①熟悉水體浮游植物藻類的采樣方法。

②掌握葉綠素a的提取及測(cè)定方法。

(2)實(shí)驗(yàn)原理。

水樣中的藻類經(jīng)過(guò)過(guò)濾后，用90%丙酮溶液提取葉綠素a,于分光光度計(jì)上測(cè)定吸光度，根據(jù)葉綠素a在特定波長(zhǎng)下的吸收計(jì)算其含量。

(3)實(shí)驗(yàn)材料。

儀器：分光光度計(jì)、抽濾裝置、離心機(jī)、醋酸纖維濾膜及有機(jī)玻璃采樣器。試劑：碳酸鎂粉末，90%丙酮溶液。

(4)實(shí)驗(yàn)步驟。

①水樣的采集與保存。采水器一般為有機(jī)玻璃采水器，水樣量視水體中浮游植物多少而定，一般應(yīng)采0.5～2L,將采到的水樣注入水樣瓶中，放在陰涼處，避免陽(yáng)光直射；如經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間才進(jìn)行水樣的進(jìn)一步處理，則應(yīng)置低溫(0～4℃)保存，并加入1%碳酸鎂懸濁液，添加量為每升1mL,以防止水樣酸化引起色素的降解。

②抽濾。在抽濾器上裝好0.45μm醋酸纖維濾膜，倒人定量體積的水樣進(jìn)行抽濾。水樣抽完后，繼續(xù)抽1～2 min,以減少濾膜上的水分。

③提取。取出帶有浮游植物的濾膜，在冰箱中低溫干燥6～8h后取出，把濾膜放入組織研缽中，加入少量碳酸鎂粉末0.05g(如在采水樣中已加入碳酸鎂懸濁液此步可省去)和2～3 mL的90%丙酮溶液充分研磨，提取葉綠素a。

④離心。將研缽勻漿轉(zhuǎn)入離心管中，用離心機(jī)(3000～4000 r/min)離心10min,將上清液倒入5mL或10mL容量瓶中，再加入2～3mL90%丙酮溶液，繼續(xù)研磨提取，離心10min,并將上清液再轉(zhuǎn)入5mL或10mL容量瓶中，重復(fù)1～2次，*后用90%丙酮溶液定容至5mL或10 mL,搖勻。

⑤吸光度測(cè)定。將上層清液倒入1cm比色皿中，以90%丙酮溶液為參比，用分光光度計(jì)分別讀取波長(zhǎng)750 nm、663 nm、645 nm、630 nm處的吸光度。

(5)結(jié)果計(jì)算。

葉綠素a(mg/m3)=V₁×[11.64×(D₆₆₃-D₇₅₀)-2.16×(D₆₄₅-D₇₅₀)+0.10×(D₆₃₀-D₇₅₀)]/V×δ

式中：V為水樣體積，L；D為吸光度；V?為提取液定容后的體積，mL；δ為比色皿的光程，cm。

【注意事項(xiàng)】

①葉綠素a測(cè)定時(shí)要求波長(zhǎng)750 nm處的吸光度值低于0.005,目前采用的醋酸纖維濾膜過(guò)濾，離心后的上清液很難達(dá)到要求，用0.45μm孔徑聚四氟乙烯有機(jī)相針式濾器抽濾可有效降低試樣濁度，達(dá)到吸光度低于0.005的要求。

②為避免研磨樣品轉(zhuǎn)移時(shí)產(chǎn)生的損失，可將帶有浮游植物的濾膜直接放入具塞試管中，用吸管加入90%丙酮溶液10 mL置于冰箱，低溫提取6～8h,其他步驟相同。